[摘要]:目的观察营养缺乏状况下干扰p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法构建RNA干扰抑制ASPP2的慢病毒载体表达体系并感染肝癌细胞HepG2,通过电镜观察、MTS法检测、流式细胞术检测以及形态学观察,探讨在缺乏氨基酸和血清的培养条件下干扰ASPP2表达对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响,并以自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)进行干预,探讨ASPP2下调后对细胞的作用是否与自噬有关。结论在缺乏营养的状态下,下调ASPP2可能通过调节自噬促进肝癌细胞的增殖和存活。
   
   [关键词]:ASPP2;肝细胞癌;细胞增殖;缺营养;自噬
   
   3讨论
   ASPP2是ASPP家族中最早被发现的成员,对其功能研究较为充分。大量研究表明ASPP2表达的降低在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用。动物实验发现,ASPP2-/-小鼠无法长期存活,而ASPP2+/-小鼠可自发形成多种肿瘤,与野生型小鼠相比,ASPP2+/-小鼠对γ射线介导的肿瘤生成敏感性显著增加。临床研究发现,在弥漫性大B细胞淋巴瘤中,ASPP2的低表达和不良的临床结果有关;Cobleigh等发现在乳腺癌患者中ASPP2低表达与无瘤生存期短有关;Sgroi等利用基因芯片方法比较转移的乳腺癌与非转移乳腺癌,发现转移的乳腺癌中ASPP2表达下降,表明ASPP2表达下降可能与乳腺癌的转移、进展有关。本课题组前期研究表明肝癌患者肝癌组织中ASPP2表达下调,而在肝癌细胞株中采用RNA干扰技术沉默ASPP2表达可促进肝癌细胞的生长和转移。