【摘要】目的探讨胰岛素治疗对2型糖尿病状态下脂肪细胞的色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。方法对22例初诊2型糖尿病患者进行为期2周的胰岛素强化治疗,分析比较其治疗前后空腹血糖、血甘油三酯及PEDF水平变化。对8周龄雄性SD大鼠进行高脂饮食喂养联合小剂量链脲佐菌素诱导,建立2型糖尿病大鼠模型,随机数字表法分为糖尿病组、胰岛素治疗组、格列齐特治疗组,另设正常饮食对照组。分化成脂的333-L1脂肪细胞加入肿瘤坏死因子.d(TNF.d)和(或)胰岛素干预24h。用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫印迹法(Western印迹)检测脂肪组织或细胞PEDF表达水平,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清或脂肪细胞培养液上清中PEDF的含量。将333-L1脂肪细胞分为对照组、PEDF处理组、抗PEDF抗体处理组,测定各组脂肪细胞对3H.葡萄糖的摄取率。结果2型糖尿病患者胰岛素治疗后,空腹血糖与血甘油三酯均显著下降[(12.9±2.8)与(5.9±1.4)mmol/L、(3.1±1.8)与(1.7±0.8)mmol/L,P<0.05],并有血清PEDF水平明显降低[(22.85±5.73)与(18.38±5.28)mg/L,P<0.05]。糖尿病大鼠血清PEDF水平高于对照组和胰岛素治疗组[(28.6±0.5)、(25.4±0.6)、(25.3±0.6)µg/L,P<0.05],并伴有脂肪组织PEDF、TNF-α的mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),胰岛素治疗后上述指标均下降(P<0.05),但在格列齐特组并无明显改善。进一步实验发现,TNF-α诱导3T3-L1脂肪细胞PEDF表达及分泌增多(P<0.05),而该作用可被胰岛素减弱(P<0.05)。此外,PEDF下调313-L1脂肪细胞葡萄糖摄取率的作用可被抗PEDF抗体拮抗(P<0.05)。结论胰岛素可下调2型糖尿病状态下脂肪细胞及血清中PEDF的表达,改善脂肪细胞的葡萄糖摄取率,这可能是胰岛素治疗改善胰岛素抵抗的机制之一。
       
       【关键词】胰岛素;糖尿病,2型;色素上皮衍生因子;脂肪细胞
       
       
       讨论
       近年研究发现,PEDF与代谢综合征及糖尿病存在密切联系。多项临床研究证实PEDF水平与血糖、糖化血红蛋白、体质指数、炎症因子TNF.01呈显著正相关。有研究发现,肥胖大鼠脂肪细胞内及血清PEDF水平显著高于低体重大鼠,减重后PEDF随之降低。一项体外研究得出,PEDF可诱导脂肪及骨骼肌细胞的胰岛素抵抗,表明其在糖脂代谢紊乱中发挥重要的负调控作用。本研究发现,初诊T2DM患者循环及脂肪组织中的PEDF水平升高,经胰岛素强化治疗后PEDF表达显著下降,并伴有糖代谢的改善;胰岛素的这些作用在T2DM大鼠及3T3-L1脂肪细胞模型中同样得到证实,但格列齐特组未见明显改变,提示该作用与血糖降低无关,这有待在人群研究中进一步证实。
       脂肪组织是循环PEDF的主要来源之一。研究发现,PEDF水平与体脂含量正相关,减重后PEDF水平显著下降,并伴有胰岛素敏感性明显改善。PEDF可促进脂肪组织中甘油三酯水解酶表达,使过多的游离脂肪酸进入血循环,导致肝脏、肌肉等外周组织异位脂质沉积,从而引起胰岛素抵抗。因此推测,在肥胖状态下,脂肪组织代偿性分泌PEDF增多,造成脂质分解增强,异位脂质沉积,进而加重胰岛素抵抗状态;而胰岛素治疗可降低PEDF水平,改善脂肪细胞的葡萄糖摄取率。