【摘要】:目的:制备新型凋亡显像剂99mTc-HYNIC-Tat49-57-DEVD,研究其在健康小鼠体内的生物学分布,为其进一步应用于核素凋亡显像奠定实验基础。方法:设计合成 Caspase-3特异性底物多肽,经化学修饰后与穿膜肽HIVTat49-57连接,采用间接标记法,在螯合剂联肼尼克酰胺(HYNIC)和协同配合体三羟甲基甘氨酸及乙二胺二乙酸。结论:显像剂99mTc-HYNIC-Tat49-57-DEVD 的制备方法可行,标记物稳定,在血液中的清除速度快,主要通过肝脏和肾脏排泄,为其进一步应用于体内凋亡显像奠定了基础。
   
   【关键词】:Caspase-3;放射性核素;显像剂;生物学分布;BALB/c小鼠
   
   
    3讨论
   凋亡显像是,随着对细胞凋亡研究的深入,不断有新型的显像剂产生,其中最具代表性的如膜联蛋白 Annexin-V的标记物,突触结合蛋白I的C2A片段的标记物等等。前者是利用细胞凋亡时其膜脂双分子层中的磷脂酰丝氨酸(PS)由内层迁移至外层并能与 Annexin-V 高度亲和的现象,后 者是神 经 细胞突 触 囊 泡 上 的一种蛋白,也具有插入 PS 的能力,可与凋亡细胞结合。相关研究取得不错进展,但仍有部分问题亟待解决,如 PS的外翻 并不特 异 性 的 仅 发 生 在 凋 亡 细 胞中,凋亡检测效率低下等等,这就为活体显像带来了一定的假阳性和假阴性。为解决以上问题,本课题组设计合成了一种新型的凋亡显像剂,99mTc-HYNIC-Tat49-57-DEVD,相较于其他凋亡显像剂而言,它具有更多优点:不仅是Caspase-3 的底物多肽,还连接有穿膜肽可以进入胞膜,而Caspase-3的激活是细胞凋亡信号转导通路的共同途径,在凋亡进程中要早于磷脂酰丝氨酸的外翻 。