【摘要】:目的:研究子宫内膜干细胞(endometrialstemcells,EnSCs)来源细胞因子“鸡尾酒”(EnSC-derivedcytokinecocktail,EdCC)对心肌缺血再灌注损伤的影响及MEK-ERK信号通路的作用。方法:建立小鼠心肌缺血再灌注损伤模型,用TTC/Evansblue染色评估心梗面积,TUNEL染色检测细胞凋亡,Westernblot检测ERK1/2磷酸化水平和cleavedcaspase-3表达。结果:EnSCs具有间充质干细胞特性,表达CD90,不表达CD34和CD45。EdCC的表皮生长因子(EGF)含量为(6811±312)ng/g蛋白。经尾静脉注射EdCC可显著升高心肌ERK1/2磷酸化水平,明显降低梗死面积,减少梗死周边区凋亡细胞数目,抑制capase-3活化。MEK1特异性阻断剂PD98059(5mg/kg)抑制EdCC介导的ERK1/2磷酸化,并抵消上述心肌保护效应。EGF受体特异性阻断剂AG-1487(6mg/kg)只能部分抵消EdCC的心肌保护作用,而单纯注射EGF不能缩小梗死面积。结论:EdCC通过激活MEK1-ERK1/2信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤,EGF受体是该通路重要组成部分。该结果对目前成体干细胞移植治疗模式-从细胞转移到细胞因子,具有重要的理论意义。
   
   【关键词】:子宫内膜干细胞;细胞因子“鸡尾酒”;Ras-Raf-MEK-ERK信号通路;心肌梗死;缺血再灌注损伤
   
   讨论
   心肌缺血再灌注损伤占最终心梗面积的50%[13],如存活心肌无法代偿损伤心肌的收缩力,将发展成充血性心力衰竭。目前学术界已逐渐达成共识,心脏是终末分化器官,无论自然或疾病状态其自我增殖修复的能力微乎其微[14]。干细胞移植、基因疗法等促进心肌再生的治疗方法临床试验疗效甚微[5],或因多种潜在风险仍处于动物研究阶段[15]。因此,致力寻找具有心肌保护效应的药物并探索其信号转导途径,从分子机制理解心肌细胞坏死与存活并设计治疗靶点以减少心肌细胞坏死、缩小梗死面积显然具有十分重要的意义。心肌对缺血再灌注损伤的反应分为两阶段。在缺血期,部分心肌细胞因急性缺氧坏死,存活心肌细胞出现酸中毒、水肿、钠钙离子超载等病理生理改变;在再灌注期,存活的心肌细胞因迅速恢复能供反而出现更加严重的损伤[3]。我们的前期研究发现EnSCs移植减少大鼠持续冠脉结扎导致的心肌细胞凋亡并缩小梗死面积[8],为契合临床情况,充分利用EdCC的治疗效果,我们在结扎小鼠冠脉5min后即注射EdCC,30min后再灌注,24h后TTC/Evansblue结果显示梗死面积较对照组减少24%。