【摘要】:目的:探讨Npc1基因突变小鼠肾脏功能及病理生理的变化,为C1型尼曼-匹克氏症(NPC1)患者临床上药物的使用及肾功能的维持提供理论依据。方法:用PCR法确定小鼠基因型;选取出生后第60天(P60)的野生型NCPC1(Npc1+/+)和突变型NCPC1(Npc1-/-)小鼠,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性及尿素(Urea)、尿酸(UA)和肌酐(Cr)的含量来评价Npc1-/-小鼠的肝肾功能变化;进一步常规冷冻切片后通过β-半乳糖苷酶染色及Masson染色来分别评价Npc1-/-小鼠肾脏衰老及纤维化情况。结果:与P60的Npc1+/+小鼠相比,Npc1-/-小鼠的体重和肾脏重量显著降低(P<0.01);肝肾功能明显减退:ALT、AST及LDH活性显著升高(P<0.05),Urea、UA及Cr的含量显著增加(P<0.05);冷冻切片染色结果表明肾脏组织衰老明显(P<0.01),纤维化程度显著增强(P<0.01)。结论:Npc1基因突变导致的脂质异常代谢可加速肾间质纤维化,促使肾脏衰老,最终导致肾功能减退。
   
   【关键词】:C1型尼曼-匹克氏症;肾脏;纤维化;Npc1基因
   
   讨论
   NPC1作为一种典型的神经退行性疾病,是由Npc1基因突变所引起的,其所编码的蛋白是由1278个氨基酸残基组成的细胞膜蛋白分子,可直接结合胆固醇后将其从脂质体转运到质膜和内质网,从而调节细胞内脂质代谢平衡[7-9]。该病多发于幼儿,少数在中青年发病,由于NPC病因的不可逆性,国内外目前尚缺乏有效的治疗手段,主要以预防性和支持性治疗为主,最大限度延长患者寿命,改善患者生活质量。前期研究发现,NPC1患者神经组织中存在大量异常胆固醇、鞘磷脂及糖脂的沉积,其主要病理特征为神经轴突营养不良伴有球状轴突形成、神经元变性以及进行性脱髓鞘;进一步的研究表明,NPC1患者海马等脑区存在大量的神经元纤维缠结(neurofi-brillarytangles,NFT),除异常磷酸化的tau蛋白外,还发现NFT或球状轴突内聚集了大量高度磷酸化的细胞骨架蛋白[10-12]。近年来,针对该疾病经典动物模型Npc1-/-小鼠的深入研究发现,该小鼠的丘脑-皮质系统在出生后3周左右即出现大量阿米巴样的小胶质细胞,其活性随着病情的发展逐渐增强,而大脑的不同部位超磷酸化神经细丝表达量也随着病情发展显著增加,产生大量的NFT,导致神经元变性或死亡,引起海马、丘脑、小脑和脊髓等多处神经组织发生病理性变化[13-15]。