【摘要】:目的探讨miRNA-143对鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖、迁移和侵袭的影响。方法利用荧光定量PCR检测人永生化鼻咽上皮细胞(NP69)、高分化鼻咽癌细胞(CNE-1)、低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)中miRNA-143的表达水平。利用感染慢病毒的方式建立稳定过表达miRNA-143的CNE-2Z细胞,并用荧光定量PCR法进行检测。通过CCK-8法检测过表达miRNA-143对CNE-2Z细胞增殖的影响,通过Transwell迁移和侵袭试验分析过表达miRNA-143对CNE-2Z细胞迁移和侵袭的影响。结果低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)中miRNA-143的表达水平显著低于CNE-1和NP69细胞(P<0.01)。稳定过表达miRNA-143的CNE-2Z细胞(CNE-2Z/miR-143)中miRNA-143的表达水平显著高于CNE-2Z细胞(P<0.01)和慢病毒对照组细胞(CNE-2Z/miR-NC)(P<0.01)。细胞增殖能力检测显示,与CNE-2Z组和CNE-2Z/miR-NC组相比,CNE-2Z/miR-143组在72h和96h时细胞活力显著降低(P<0.05,P<0.01)。Transwell迁移和侵袭试验结果显示,CNE-2Z/miR-143组与CNE-2Z组和CNE-2Z/miR-NC组相比细胞迁移和侵袭能力显著下降(P<0.01)。结论miR-143能够抑制鼻咽癌细胞CNE-2Z的增殖、迁移和侵袭能力,提示其可能对鼻咽癌的诊断、治疗及预后评价有重要意义。
   
   【关键词】:鼻咽癌;miR-143;CNE-2Z细胞;迁移;侵袭
   
   3讨论
   miRNA是一类内源性小RNA片段(约22bp),广泛存在与器官组织中,通过与特定基因的mRNA结合并使其降解,下调特定基因的表达。近年来miRNA的作用在肿瘤研究领域受到广泛关注,改变miRNA的表达与细胞去分化、细胞增殖、肿瘤的转移和侵袭有关[10-12]。miRNA表达下降已被作为重要的肿瘤分子标志,作为重要的肿瘤诊断和治疗靶标。miRNA-143位于染色体5q32~33,在造血系统[9]、乳腺[13]、肺、胃肠道[8]、前列腺[14]、卵巢[15]、神经系统[7]肿瘤中均观察到miRNA-143表达下调。此外,研究[11]还显示miRNA-143可以直接作用与肿瘤发病机制相关的基因,如kras、elk1、myo6、bcl-2和erk5等。本研究比较了NP69、CNE-1和CNE-2Z中miRNA-143的表达水平,结果显示NP69细胞中miRNA143的表达水平较CNE-1和CNE-2Z高,CNE-2Z中miRNA-143的表达水平最低。通过慢病毒成功建立过表达miRNA-143的CNE-2Z细胞,分析细胞增殖能力显示过表达miRNA-143的CNE-2Z细胞(CNE2Z/miRNA-143)的增殖能力较慢病毒CNE-2Z/miRNA-NC和正常CNE-2Z显著降低。Transwell细胞迁移和侵袭实验显示过表达miRNA-143可以显著降低CNE-2Z细胞的迁移和侵袭能力。上述实验结果表明miRNA-143在鼻咽癌细胞CNE-2Z中具有抑制细胞增殖、迁移和侵袭的作用。先前的报道[8-9]显示miRNA-143对与细胞增殖相关的基因kras、dnmt3a、erk5、akt以及与细胞迁移侵袭相关的基因tlr2、arhgef2、mmp-13有负调节作用。在CNE-2Z细胞中miRNA-143可能通过对这些基因的调控影响细胞的增殖、迁移和侵袭。
   
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