[摘要]:目的建立舒血宁注射液中4种氨基酸(天门冬氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸)的高效液相色谱(HPLC)柱前衍生化法,为舒血宁注射液的质量控制提供方法。方法以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,乙腈-水(5∶1)-乙酸铵缓冲溶液(pH6.5)为流动相,梯度洗脱,检测波长为254nm,测定舒血宁注射液中天门冬氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸的含量。结论本方法简便、准确、可靠,适用于舒血宁注射液中氨基酸含量的测定。

[关键词]:舒血宁注射液;柱前衍生;天门冬氨酸;苏氨酸;丙氨酸;甲硫氨酸

3讨论

本研究分别考察了流动相组成[乙腈-水,乙腈-水(5∶1)-乙酸钠缓冲溶液(pH6.5)]对4种氨基酸色谱分离的影响,研究结果表明采用梯度洗脱方式,以乙腈-水(5∶1)-乙酸钠缓冲溶液(pH6.5)为流动相,4种氨基酸分离效果较好,且峰形较佳

。本研究最终确定了乙腈-水(5∶1)-乙酸钠缓冲溶液为分离舒血宁注射液中氨基酸的最佳流动相。由于氨基酸没有紫外吸收,不能用紫外直接检测,需要衍生后在紫外下才可检测。异硫氰酸苯酯是常用氨基酸测定的衍生试剂,与氨基酸衍生化反应迅速,所得产物稳定,同时柱前衍生高效液相色谱法具有分析时间短,选择性强,节约成本等特点。因此,本文采用PITC柱前衍生高效液相色谱检测方法,对舒血宁注射液中的4种氨基酸进行定量分析,结果表明这种方法稳定、准确、快速,能够准确测定舒血宁注射液中的4种氨基酸含量。