摘要:目的研究在体外条件下葛根素对顺铂引发的大鼠卵巢颗粒细胞损伤的影响。方法分离获取2l~25日龄Wistar雌性大鼠的卵巢颗粒细胞。建立稳定的生长和传代体系,鉴定获取颗粒细胞纯度,以MTT法绘制细胞生长曲线。取对数生长期细胞,以浓度分别为1、2.5、5、10、20µg/ml的顺铂作用于细胞,继续培养48h后行MTT法检测,并由吸光度计算出细胞相对活力。描述顺铂药物浓度和颗粒细胞相对活力之间的关系。选定5、10、20µg/ml三组浓度的顺铂致颗粒细胞损伤,各组均加入0.1、0.5、1mg/ml不同浓度的葛根素稀释液培养,MTT法检测。判断葛根素对颗粒细胞相对活力的回复能力,以及浓度与效应之间的关系。结果顺铂可以抑制颗粒细胞的生长,并且抑制效应具有剂量依赖性。当顺铂浓度为1µg/ml时,可抑制颗粒细胞的生长,与对照组相比较差异有统汁学意义(P<O.05);当顺铂浓度≥2.5µg/ml时,明显抑制颗粒细胞的生长,与对照组比较差异有统计学意义(P<O.01),抑制效果呈剂量依赖性。当顺铂浓度达到20µg/ml,颗粒细胞生长的相对活力较对照组下降近30%,选用5、10、20µg/ml:三种浓度顺铂引发卵巢颗粒细胞损伤,在三种条件下分别加入0.1、0.5及1mg/ml葛根素三种药物浓度共同作用。实验结果显示,葛根素对于3种浓度顺铂引发的卵巢颗粒细胞损伤均有一定程度的抑制作用,且抑制效用具有剂量依赖性。当顺铂浓度升高而导致细胞活力明显下降时,葛根素的保护效应并不发生明显改变。结论三种浓度的葛根素均能够在体外条件下对顺铂引发的大鼠卵巢颗粒细胞损伤起到抑制作用,作用效应具有剂舒依赖性;当顺铂浓度升高导致卵巢颗粒细胞损伤增加明显时,葛根索的保护作用未被减弱。
   
   关键词:葛根素;顺铂;卵巢颗粒细胞
   
   
   3讨论
   卵巢颗粒细胞是卵泡中重要的功能细胞之一,其可通过间隙连接,以自分泌和旁分泌的方式维持有利于卵母细胞生长和成熟的微环境。颗粒细胞在卵巢局部为环境调节中发挥着重要作用。在卵巢中,99%以上的卵泡闭锁究其缘由是因为卵巢颗粒细胞的凋亡,所以卵巢颗粒细胞是在体外条件下研究卵巢功能的很好选择。顺铂是一类具有较强毒性的临床常用化疗药物,是一种配位化合物,由顺式的2个氯原子组成的平面结构。当它的氯原子被水分子取代时,呈阳性电荷,可以与DNA上的碱基结合从而破坏DNA功能,致使DNA不能复制,最终导致死亡。