[摘要]:目的探讨甲基转移酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷(DAC)对胆管癌细胞TFK-1侵袭力的影响及其机制。方法采用Transwell法检测胆管癌细胞在不同浓度DAC(0、10、20、40、80、160μmol·L-1)作用下侵袭力的变化;Western-blot法检测DAC作用后Wif-1蛋白的表达。结果DAC对胆管癌细胞侵袭力有显著性抑制(P<0.05),且呈浓度依赖性;Wif-1蛋白在TFK-1细胞中未见表达,DAC处理后Wif-1蛋白再现表达。结论DAC对胆管癌TFK-1细胞的侵袭有抑制作用,此作用可能是由Wif-1基因去甲基化来实现。
   
   [关键词]:5-氮-2-脱氧胞苷;Wif-1;胆管癌;侵袭力
   
   3讨论
   胆管癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤,由于其发生部位特殊,早期诊断困难,患者就诊时多已出现局部侵犯和远处转移,给临床治疗带来极大的困难,人们一直在期望寻找到更有效的治疗手段。随着表观遗传学的进一步深入研究,胆管癌的治疗有可能得到进一步的强化。DNA甲基化是表观遗传学的重要内容,DNA甲基化指在DNA甲基化转移酶的作用下,基因组CPG二核苷酸的胞嘧啶5′碳位共价键结合成一个甲基基团。DNA甲基化会关闭相关基因的活性而导致其不能表达,如去甲基化则可使该基因重新活化与表达。抑癌基因启动子区域CPG岛高度甲基化后导致相关抑癌基因表达沉默而不能发挥其抗肿瘤的作用,是肿瘤发生发展的重要原因。
   本实验结果显示,由于Wif-1基因启动子的去甲基化,胆管癌细胞中Wif-1蛋白表达明显减少或消失,在DAC作用于胆管癌细胞后,Wif-1蛋白开始表达,胆管癌细胞开始出现凋亡,可能与DAC的去甲基化有关,而且随着DAC浓度的增加,胆管癌细胞的侵袭力也明显下降,提示DAC可以逆转胆管癌组织中Wif-1基因启动子的去甲基化,进而促进胆管癌细胞的凋亡,为将来DAC应用于胆管癌的治疗提供有效的实验基础。