[摘要]目的:采用蛋白质组学技术分析胆固醇结石患者与正常人去浆膜层胆囊组织蛋白表达谱的差异,通过质谱技术鉴定差异表达蛋白,为胆石成因提供实验依据。方法提取胆固醇结石患者和正常人去浆膜层胆囊组织蛋白,构建相应的双向电泳蛋白质表达谱并应用ImageMaster图像分析软件获得差异蛋白点信息,采用质谱鉴定差异表达蛋白质。结论初步建立了胆固醇结石患者与正常人去浆膜层胆囊组织的差异蛋白质表达谱,分析、鉴定并验证了差异蛋白点,为胆固醇结石形成的关键调控蛋白质研究提供实验依据。
   
   [关键词]:胆固醇结石;双向凝胶电泳;比较蛋白质组学
   
   3讨论
   研究表明胆囊功能受损与胆石形成密切相关,与胆固醇结石的相关度更高,胆囊排空功能受损使得胆囊胆汁存在胆囊中更长时间,从而成核、结晶,最终导致结石形成。胆汁中成分(脂类、蛋白质等)改变也可以影响胆囊壁功能变化,反之胆囊收缩变化也可影响胆汁成分改变,两者相互作用。当某些因素导致胆囊吸收和分泌功能的异常,胆囊运动功能障碍,胆汁黏度流变特性改变,最终也可导致胆囊胆固醇结石的形成。胆囊功能异常包括胆囊动力功能异常和胆囊黏膜分泌功能异常,主要集中于胆囊的黏膜层与肌层,而处于最外层的浆膜层则参与较少。双向电泳虽然仍是目前可以分辨最多蛋白质种类的技术,并在技术上已有了很大的改进,使其重复性和灵敏度大大提高,但它无法检测疏水性蛋白、极端pH的酸性蛋白和碱性蛋白以及某些低丰度蛋白,因此远不能捕获细胞内的全部蛋白质。质谱在蛋白质分析方面虽然具有高分辨率和高灵敏度的优点,但它需要在检测之前对样品进行必要的纯化,因而也无法实现高通量的蛋白质分析。