[摘要]目的:研究蛋白酶体抑制剂MG132抑制胆囊癌细胞增殖及诱导凋亡的机制。方法采用CCK8和流式细胞术检测胆囊癌细胞增殖及凋亡情况;采用Westernblotting和RT-PCR检测凋亡相关基因Caspase-8、Caspase-3和DR5的mRNA和蛋白质表达;建立荷瘤裸鼠模型,观察MG132干预下裸鼠瘤重及瘤体积的变化。结果 在本研究中发现MG132能有效抑制体外和体内胆囊癌细胞的增殖,其作用呈剂量依赖性(P<0.01)。MG132能促使胆囊癌细胞发生G2/M期阻滞及诱导细胞凋亡。MG132诱导胆囊癌细胞凋亡主要通过激活外源性凋亡通路中DR5、Caspase-8和Caspase-3过表达。结论MG132能对胆囊癌细胞起杀伤作用,其机制可能通过影响细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡起作用。
   
   [关键词]:胆囊癌;蛋白酶体抑制剂;增殖;凋亡
   
   3讨论
   在进一步研究中,我们发现MG132能剂量依赖性地促进胆囊癌细胞发生G2/M期阻滞及诱导细胞凋亡,这些结果提示MG132对胆囊癌细胞的杀伤作用主要是通过影响细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡起作用。杨洋等的研究也证明,MG132在食管鳞癌中也能通过抑制肿瘤细胞增殖,促进凋亡,提高顺铂的杀伤作用。细胞凋亡主要通过内源性凋亡途径和外源性凋亡途径。既往研究发现在细胞凋亡过程中,细胞膜上死亡受体DR5和DR4能与TRAIL配体结合启动外源性凋亡信号通路,发挥促凋亡的作用。目前,DR5和DR4已成为细胞凋亡调控研究中的热点。外源性TRAIL通过与肿瘤细胞膜上DR5和DR4受体结合发挥强大的肿瘤细胞杀伤作用已被较多实验所证实,显示出较大的临床应用价值,但同时也发现部分肿瘤细胞存在耐药现象。有文献报道UPP途径能通过影响死亡受体介导的细胞凋亡通路调控细胞凋亡。