[摘要]目的:探讨水通道蛋白(AQP)5基因对异位子宫内膜腺上皮细胞增殖及迁移的影响。方法:构建可靶向沉默AQP5基因的质粒,在293T细胞中包装形成病毒颗粒后,感染原代培养的异位子宫内膜腺上皮细胞,分别通过逆转录PCR及蛋白质印迹法鉴定异位子宫内膜腺上皮细胞中AQP5mRNA和蛋白表达。MTT法测定细胞增殖;Transwell技术检测细胞的体外迁移能力;蛋白质印迹法检测丝氨酸/苏氨酸蛋白酶(AKT)活化情况。构建裸鼠腹腔内子宫内膜异位症体内模型,考察阴性对照组和AQP5沉默组子宫内膜腺上皮细胞在裸鼠腹腔内瘤体生长情况及腹膜转移情况。结果:体外实验结果显示,AQP5沉默后异位子宫内膜腺上皮细胞的增殖能力在第7天时明显抑制(P<0.05);AQP5沉默组异位子宫内膜腺上皮细胞磷酸化(p-AKT)表达减少,而AKT表达无改变,p-AKT/AKT减少(P<0.05);AQP5沉默组比阴性对照组迁移细胞数减少(P<0.05)。体内实验结果显示,与阴性对照组比较,AQP5沉默组瘤体结节数相对较少,体积较小,其中腹膜瘤体结节数少于阴性对照组(P<0.05)。结论:AQP5基因沉默可抑制异位子宫内膜腺上皮细胞的增殖及迁移能力,其机制可能与AKT活化有关。
   
   [关键词]子宫内膜异位症;水通道蛋白质5;子宫内膜;基因沉默;上皮细胞/代谢;细胞增殖;细胞运动
   
   
   3讨论
   我们之前在子宫内膜癌中的研究发现,雌激素可促进AQP5在内膜癌细胞的表达,进而提高子宫内膜癌细胞的迁移侵袭和黏附能力。子宫内膜异位症在组织学上是一个具有侵袭能力的良性疾病,其异位内膜病灶的形成与癌系细胞转移的生物学特性类似,也是一个“迁移黏附血管形成”的过程。子宫内膜异位病灶的形成是一个极其复杂的过程,已经发现异位子宫内膜腺上皮细胞存在某些特性,如细胞表达表面分子标记物阶段特异性胚胎抗原1(SSEA-1)及多种转移诱导蛋白。但目前尚无AQP5对异位子宫内膜腺上皮细胞功能影响的研究。本研究选择卵巢异位子宫内膜组织为研究对象,培养原代异位子宫内膜腺上皮细胞,建立体外细胞模型,利用慢病毒技术稳定沉默AQP5表达,进一步阐明AQP5对异位子宫内膜腺上皮细胞的影响并明确其在细胞增殖和迁移能力中的意义。