【摘要】:目的观察阿米卡星对小鼠内耳水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)表达的影响,探讨AQP4在阿米卡星耳毒性机制中的可能作用。方法60只CBA/CaJ小鼠随机分为实验组和对照组,每组30只,实验组小鼠皮下注射阿米卡星450mg·kg-1·d-1,每天1次,共14d,对照组小鼠皮下注射等量生理盐水。注射4天后应用免疫组化染色分别检测两组小鼠耳蜗AQP4的表达及定位情况,应用蛋白免疫印迹技术及RT-PCR技术检测两组小鼠内耳AQP4表达水平的变化。结论阿米卡星可导致小鼠内耳AQP4蛋白及基因表达的下调,这可能是阿米卡星耳毒性的机制之一。
   
   【关键词】:阿米卡星;内耳;水通道蛋白4;小鼠
   
   3讨论
   AQP4是AQP家族中影响水通透性最高的蛋白,在小鼠及大鼠内耳表达的部位非常相似,主要定位于Hensen细胞的基侧质膜、Claudius细胞和内沟细胞的基底侧质膜,前庭部分的斑和嵴、耳蜗神经、前庭神经的中枢部上皮也有AQP4。此外,大鼠和小鼠的前庭感受器周围的支持上皮、听神经周围的神经胶质细胞也有AQP4表达。从本研究结果看,AQP4在小鼠内耳中主要定位于Corti器的支持细胞,蜗轴螺旋神经节、耳蜗外侧壁等部位均未见阳性染色细胞。人体标本的免疫组化染色表明AQP4表达于外沟细胞、Hensen细胞、Claudius细胞、前庭支持细胞及内淋巴囊上皮。AQP4在内耳组织的表达定位提示其可能参与维持内耳感觉上皮的水渗透平衡,并且种属间AQP4表达的相似性和调节序列的保守性提示AQP4在内耳的功能高度保守和稳定作用。