【摘要】背景神经丝蛋白200(NF200)是特异性分布于神经元轴突内,维持神经元形态、反映其功能、检测轴突再生状况的一个间接指标。NF200是否参与了视网膜缺血一再灌注损伤(RIRI)后整个视觉传导通路的异常变化有待进一步研究。目的研究RIRI后各时间点大鼠视觉传导通路中视网膜、外侧膝状体、上丘脑及视皮质等部位NF200的表达。方法应用随机数字表法将40只SD大鼠随机分为RIRI1、2、3、4、6、8周组,伪手术组和正常对照组,每组5只大鼠。RIRI组采用前房灌注生理盐水法制作RIRI模型,以右眼为损伤眼;伪手术组仅行前房穿刺而不灌注生理盐水。于RIRI后1、2、3、4、6、8周处死大鼠,摘除大鼠眼球,并取外侧膝状体、上丘脑及视皮质组织制备冰冻切片,采用免疫组织化学法检测NF200在上述大鼠各部位神经元及轴突中的表达。结果大鼠RIRI1、2、3、4、6、8周组、伪手术组和正常对照组损伤眼视网膜神经节细胞(RGCs)层NF200的表达量(A值)总体比较差异有统计学意义(F=78.855,P=0.000),其中RIRI1周组NF200表达较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(t=36.563,P<O.01)。RIRI1周后可见损伤眼对侧外侧膝状体NF200的表达较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(t=6.483,P<O.01),而损伤4周、6周后对侧外侧膝状体NF200的表达较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(t=2.904、4.313,P<0.01)。RIRI1周可见损伤眼对侧上丘脑NF200的表达较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(t=2.966,P<0.05),2周对侧上丘脑NF200的表达较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(t=7.397,P<0.01)。RIRI2、3、4周后双侧视皮质NF200的表达较正常对照组明显增加,差异均有统计学意义(对侧:t=18.728、18.213、15.088,P<O.01;同侧:t=8.690、5.704、7.805,P<0.叭)。结论RIRI可造成损伤眼的RGCs、对侧外侧膝状体、上丘脑及双侧视皮质神经元轴突的损伤。
   
   【关键词】视网膜;缺血-再灌注损伤;视路;神经丝蛋白200
   
   
   3讨论
   急性高眼压RIRI模型着眼于青光眼的发病机制和潜在的治疗策略,被认为是研究视神经、中枢视觉系统损伤及再生修复的理想模型。青光眼引起的RIRI可损伤RGCs,并导致与之有突触联系的脑内靶视觉结构的继发性损害。研究表明,球后及颅内视神经段、外侧膝状体、视皮质等组织均有青光眼退行性改变,包括神经元丢失、萎缩,反应性胶质增生和小胶质细胞活化。RIRI沿着解剖及功能神经通路的突触联系,通过损伤的神经元投射到正常的神经元,导致神经元变性。有证据表明,升高的眼压所诱导的脑内显著变化先于可检测到的RGCs丢失,表明青光眼是早期的跨突触变性疾病。顺行性和逆行性轴突运输是神经末梢和神经元胞体之间传递的细胞外成分(如生长因子)和细胞内成分(如再循环突触小泡)所必不可少的,青光眼可能通过干扰顺行和逆行轴突运输系统造成视觉传导通路中突触数量及功能的异常,并最终导致神经元的变性及死亡。神经轴突病变先于神经元胞体变性,被认为是神经元损伤的早期征象,青光眼RGCs和轴突的改变显示其对视觉刺激的反应性减低,揭示轴突病理性改变和视觉功能障碍的直接联系。