【摘要】:目的了解年龄相关性听力损失小鼠耳蜗毛细胞的凋亡方式,探讨半胱氨酸蛋白酶(caspase)抑制剂z-VAD-FMK[z-Val-Ala-Asp(Ome)-fluoromethylketone]防治老年性聋的效果。方法选用新生NMF308nmf/nmf小鼠14只和成年同窝NMF308nmf/nmf小鼠32只,分为新生小鼠腹腔注射组(14只)、成年小鼠腹腔注射组(14只)和成年小鼠圆窗膜注射组(18只),各组又分为治疗组(注射z-VAD-FMK)和对照组[注射二甲基亚枫(dimethylsulfoxide,DMSO)],采用圆窗膜局部和腹腔注射两种方法给药,给药前后行ABR检测,用免疫荧光染色化学技术TUNEL、caspase-3和PI(碘化丙啶)染色标记耳蜗毛细胞,观察各组耳蜗毛细胞的凋亡和存活状况。结论NMF308nmf/nmf小鼠耳蜗毛细胞的死亡方式以caspase-3凋亡途径为主,应用caspase-3抑制剂z-VAD-FMK定向内耳给药,可以阻断caspase-3信号途径激活所导致的毛细胞凋亡,从而有效防治老年性聋。
   
   【关键词】:老年性聋;外毛细胞;凋亡;抗凋亡抑制剂;动物模型
   
   3讨论
   目前,老年性聋动物耳蜗毛细胞死亡的分子途径目前尚不十分清楚。因此探明控制耳蜗毛细胞死亡的分子机制,是发展新的预防和治疗耳聋策略的关键。老年性聋患者的颞骨标本来源困难,而老年性聋动物模型因其生长期长,用形态学和免疫组织化学方法并不能完全确定耳蜗毛细胞死亡途径是坏死还是凋亡。因此,一些纯种系的动物因为具有快速老化的快速听力丧失,而作为老年性聋研究的动物模型。最常用的是C57BL/6小鼠,该种系小鼠耳蜗毛细胞在成年早期开始蜕变,随年龄增长,毛细胞从耳蜗基底回快速向蜗顶扩展,到26月龄时,几乎整个耳蜗的外毛细胞和大部分内毛细胞均丧失,此特点符合感音性老年性听力损失耳蜗的变化规律。