【摘要】:目的探讨miRNA-143(miR-143)和DNMl3a在血管平滑肌细胞增殖中的作用及机制。方法分别用miR-143的前体和抑制物干预血管平滑肌细胞(VSMCs),MTT法检测VSMCs增殖情况,qRT-PCR法检测miR-143和DNMl3a的表达,Westernblot法检测DNMT3a的蛋白表达,巢式降落式特异性甲基化PCR法分析miR-143启动子区的甲基化状态,双荧光素酶报告基因检测系统分析荧光素酶活性。结论miR-143和DNMT3a相互调控可能是VSMCs增殖的重要机制。
   
   【关键词】:miR-143;DNA甲基化转移酶3a;血管平滑肌细胞;增殖
   
   
   3讨论
   miRNAs是一类长19~25bp单链小分子非编码RNA,在生物体的发生、生长、发育及分化等过程中具有重要的调控作用,尤其在增殖性疾病如癌症等领域的研究比较多见。研究表明,miR一143在癌细胞的生长、迁移及侵袭过程中发挥调节作用。白血病患者的血清中miR一143的表达明显低于正常人,而过表达miR一143能够显著抑制非小细胞肺癌细胞的增殖活性和侵袭能力,表明miR一143与增殖性疾病密切相关。动脉粥样硬化的某些特点如VSMCs的增殖和迁移与癌症极为相似,因此推测:如果血管组织的miR一143表达发生改变,可能会导致VSMCs增殖、迁移和表型转化,进而影响动脉粥样硬化的进程。本研究用miR一143的前体干预VSMCs后,VSMCs的增殖活性显著受到抑制,而用miR一143的抑制物作用于细胞后,血管平滑肌的增殖能力显著增强,表明miR一143能够抑制VSMCs的增殖。
   综上所述,miR一143能够靶向沉默DNMT3a并抑制VSMCs增殖,同时miR一143本身又受DNMT3a的调控,即miR一143和DNMT3a相互调控能够影响VSMCs的增殖,本研究将为临床动脉粥样硬化的治疗提供新的靶点和策略。