关键词:BCA法 蛋白浓度 细胞培养板 细胞培养瓶

 

①BCA工作液的配制:蛋白标准品的各个浓度设置3个复孔,各个蛋白样品同样设置3个复孔,按照A液:B液=50:1的比例配出BCA工作液,上下颠倒混匀,4℃暂放,24h内稳定。

②设置浓度梯度,如表2.5所示:

表2.5标准蛋白浓度梯度的设置

蛋白终浓度(mg/mL)

0

0.1

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1mg/mL标准BSA(μL)

0

1

2

4

6

8

10

PBS(μL)

10

9

8

6

4

2

0

③加样反应:96孔板中每个孔加入样品10μL,再加入BCA工作液200μL,37℃恒温箱中反应30min。

④测定蛋白样品浓度:595nm测定吸光度值,重复测定三次并保存结果,根据测定的标准曲线结果计算待测蛋白样品的浓度。

 

实验所需耗材:

细胞培养板

细胞培养瓶

细胞培养皿

玻底培养皿

玻底培养板

细胞爬片

细胞刮刀

细胞筛网

血清瓶

细菌培养皿

接种环

接种针

冻存管

冻存盒

程序降温盒

离心管

微量离心管

血清移液管

巴氏吸管

移液吸头

8连管

96孔板

封板膜

封板刮刀

 

细胞培养板6孔

细胞培养板12孔

细胞培养板24孔

细胞培养板48孔

细胞培养板96孔

细胞培养锥形瓶

细胞培养透气盖悬浮摇瓶

细胞培养锥形瓶125ML

细胞培养锥形瓶250ML

细胞培养锥形瓶500ML

细胞培养锥形瓶1000ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶125ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶250ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶500ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶1000ML

硕华细胞培养瓶T25

硕华细胞培养瓶T75

硕华细胞培养瓶T175

耐思细胞培养瓶T25

耐思细胞培养瓶T75

耐思细胞培养瓶T125

耐思细胞培养瓶T175

耐思细胞培养瓶T225

细胞培养瓶密封盖

细胞培养瓶密封盖

细胞培养板平底TC处理无菌

耐思细胞培养皿35mm

耐思细胞培养皿60mm

耐思细胞培养皿100mm

耐思细胞培养皿1150mm

硕华细胞培养皿35mm

硕华细胞培养皿60mm

硕华细胞培养皿100mm

一次性培养皿

一次性细胞培养皿

无菌TC细胞培养皿

耐思玻底培养皿

硕华玻底培养皿

激光共聚焦培养皿

耐思玻底培养皿15mm

耐思玻底培养皿20mm

独立灭菌玻底培养皿

灭菌TC玻底培养皿

硕华玻底培养皿15mm

硕华玻底培养皿20mm