关键词:脂肪酶 科进 Kirgen 爱思进 Axygen 康宁 corning 耐思 NEST 白鲨易 biosharp

 

实验材料
酶样品
 
试剂、试剂盒
氯化钠 氯化钙 牛血清蛋白 牛磺胆酸钠 橄榄油-阿拉伯树胶乳胶 脂肪酶 NaOH
 
仪器、耗材
自动滴定器
 
实验步骤
实验混合物:
5 ml 橄榄油-阿拉伯树胶乳胶
5 ml H2O
2 m l 3.0 mol/L NaCl
1 ml 0.075 mol/L 氯化钙
2 ml 0.5%BSA(酵母脂肪酶)或 0.027 mol/L 牛磺胆酸钠(猪脂肪酶)
15 ml,调至 pH 8.0
 
空白对照:记录约 3 min 内,每次自动滴定器加入的滴定标准液的量。
 
样品:在实验混合物中加入合适量的稀释酶(根据活性),并记录约 5 min 内,每次自动滴定器加入的滴定标准液的量。
 
计算:
25℃、pH 8.0 时,从乳化的橄榄油中,每分钟一个单位释放出 1 umol 脂肪酸。
 
其他
试剂:
3.0 mol/L 氯化钠(NaCl,Mr=58.4;17.5 g 溶于 100 ml 水中)
0.075 mol/L 氯化钙(CaCl2·6H2O;Mr=219.1;1.62 g 溶于 100 ml 水中)
0.005 mol/L 氯化钙(稀释 0.075 mol/L 氯化钙溶液 15 倍)。
0.5% 牛血清蛋白(BSA,酵母脂肪酶)
0.027 mol/L 牛磺胆酸钠(猪脂肪酶,Mr=537.7;1.45 g 溶于 100 ml 水中)
橄榄油-阿拉伯树胶乳胶。溶解 16.5 g 阿拉伯树胶于 130 ml 水中,补充至 165 ml。加入 20 ml 橄榄油和 15 g 碎冰,低速搅拌直到乳浊液形成。用玻璃绒过滤。
脂肪酶(储存溶液:每毫升 5 mmol/L 氯化钙溶解 1 mg,实验中再稀释于 5 mmol/L 氯化钙中)
0.01 mol/L NaOH 标准溶液作为滴定剂,加入自动滴定器的滴管中。
 
 

实验所需耗材:

细胞培养板

细胞培养瓶

细胞培养皿

玻底培养皿

玻底培养板

细胞爬片

阿拉丁

细胞筛网

血清瓶

细菌培养皿

康宁

耐思

伯乐

硕华

皎洁

密理博

创博环球

碧云天

新星

白鲨易

科进

卧宏生物

爱思进

科晶

肖特

离心管

八排管

移液管

程序降温盒

免疫组化笔

滤芯吸头

巴氏吸管

加样槽

冻存盒

细胞冻存管

酶标板

载玻片

封口膜

移液器

细胞计数板

PCR板

细胞刮刀

接种针

细胞培养小室

细胞滤网

透析袋

乳胶手套

ELISA

血清

抗体

雷磁

求精

广州洁特

盐城华鸥

蜀牛

kimble chase

Falcon

WATSON

罗氏

金佰利

科默斯

武汉华美生物

其林贝尔

Biofroxx

Pall

爱马斯

麦迪康

世泰

Parafilm

古洛玻璃

merck

abcam

生工生物

天根生化

全式金

Gibco

CST

Santa

DSHB

GeneTex

Thermo

Novus

lifespan

millipore

RD