关键词:Y-迷宫 科进 Kirgen 爱思进 Axygen 康宁 corning 耐思 NEST 白鲨易 biosharp

 

实验方法原理
通过灯光和电刺激,使动物形成回避条件反射,观察和记录动物的回避条件反应能力和空间辨别能力。分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。
 
实验材料
大鼠 小鼠
 
仪器、耗材
Y-迷宫由三等分辐射式迷路箱 控制仪
 
实验步骤
一、方法
1. 筛(预)选
(1)将大鼠放入Y-迷宫箱中适应3~5 min后,给予适当电击至其对3臂均探索进入为止。选择活跃,对电击反应较敏感,逃避反应迅速者供测试用。淘汰反应过于迟钝或特别敏感的大鼠。
(2)预选出达到电击次数≤3次时连续2次正确反应的动物,即对电击反应较敏感的大鼠供实验用。
(3)在上述初步筛选的基础上,通过正式迷宫训练,淘汰达不到学会标准(学不会)的大鼠。
2. 正误判定的标准
  大鼠受电击后从起步区直接逃到安全区或通电后10s内一次性跑向安全区为“正确反应”,若逃到无灯光的任何另一臂,则记为错误反应。
3. 达标(学会)标准
(1)连续10次中有9次或以上正确反应(正确反应率≥90%)定为学会标准。
(2)每个实验日进行20次训练测试,错误反应次数(errors number EN)≤2次。全天总反应时间(total reaction time TRT)≤120s作为判定大鼠学会的标准。因为EN反映大鼠反应的正确程度,TRT反映大鼠反应时间的长短,可综合评价大鼠的学习记忆能力,因而此标准更为合理。
  以上为每只大鼠达标(学会)标准,全组大鼠达标(学会)标准为全组正确率(学会动物数/该组动物总数×100%)达85% 以上。
4. 学习测试
实验时先将大鼠放入迷宫中适应3~5 min,然后再开始正式实验。
(1)随机休息法:安全区以无规则次序变换,以训练大鼠辨别灯光刺激及安全方位的能力,大鼠受电击后逃到安全区后,灯光继续作用10~15s,熄灯后结束一次测试,大鼠所在支臂就作为下一次测试的起点,两次测试时间间隔为30s或休息1 min 后再予以第2次测试,依次重复,测试至达连续9/10标准。
(2)随机不休息法:安全区以无规则的次序变换开始时,对大白鼠所在支臂与另一支臂通电,动物在电击下逃窜至灯光区后再保持l0s或30s为一次测试。然后动物所在支臂为下次测试的起始位置进行下一次测试。
(3)顺序法:三臂末端按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ臂轮流作为起步区或安全区。
  以上方法还可以分为两类:①每天固定训练次数,一般是20次,连续训练3~4 d。大鼠一般都能达到学会标准。②不固定训练次数,采用分段连续训练法,即每训练10次,休息1 min,连续训练直到学会为止,训练在1 d内完成。一般多采用第一种方法。
5. 记忆保持(再现)测试
  学习测试24 h、48 h、1周、30 d后,再以同样方法测试至9/10标准,正确反应次数定为A,以A/10表示记忆的保持能力,此值越高说明记忆力越好。
 
二、观察指标
1. 达标所需的训练次数(电击次数、反应次数、测试次数):用动物学习达到学会标准前所需的测试数,表示其空间分辩反应的学习记忆成绩。
2. 达标所需的天(日)数:记录每只大鼠达到学会标准所用的日数。
3. 错误反应次数(errors number EN ):一个实验日完成所有反应中错误反应的次数。
4. 全天总反应时间(total reaction time TRT):动物的反应时(潜伏期)指从信号灯亮开始至大鼠第1次逃至灯亮区为止所耗的时间,全天总反应时是一个实验日(全天)完成所有反应(包括正确反应和错误反应)所需时间。
5. 主动回避率:大鼠在灯亮后但未通电的5s内完成逃避反应的次数占总反应次数的百分率。安全区灯亮,电刺激尚未开始时,大鼠即逃往安全区表明大鼠已经形成了明暗辨别条件反射(主动回避反应)。
6. 正确反应率(行为正确率):正确反应数占总测试数的百分比。
7. 全组正确率:学会动物数占该组动物总数的百分比。
8. 3 d学会率:训练第3d达学会标准的动物数占该组动物总数的百分比。动物数占该组动物总数的百分比。
 
 

实验所需耗材:

细胞培养板

细胞培养瓶

细胞培养皿

玻底培养皿

玻底培养板

细胞爬片

阿拉丁

细胞筛网

血清瓶

细菌培养皿

康宁

耐思

伯乐

硕华

皎洁

密理博

创博环球

碧云天

新星

白鲨易

科进

卧宏生物

爱思进

科晶

肖特

离心管

八排管

移液管

程序降温盒

免疫组化笔

滤芯吸头

巴氏吸管

加样槽

冻存盒

细胞冻存管

酶标板

载玻片

封口膜

移液器

细胞计数板

PCR板

细胞刮刀

接种针

细胞培养小室

细胞滤网

透析袋

乳胶手套

ELISA

血清

抗体

雷磁

求精

广州洁特

盐城华鸥

蜀牛

kimble chase

Falcon

WATSON

罗氏

金佰利

科默斯

武汉华美生物

其林贝尔

Biofroxx

Pall

爱马斯

麦迪康

世泰

Parafilm

古洛玻璃

merck

abcam

生工生物

天根生化

全式金

Gibco

CST

Santa

DSHB

GeneTex

Thermo

Novus

lifespan

millipore

RD