关键词:一氧化碳    迟发性脑病    大鼠模型    科进   Kirgen   卧宏生物   WHB   爱思进   Axygen   科晶   Cystalgen   肖特   SCHOTT

 

1.2.5灌注取材及HE染色

大鼠称重,用10%水合氯醛(0.3mL/100g)腹腔注射,麻醉成功后,暴露胸腔及心脏,将注射用针头从左心室心尖处穿刺入主动脉,剪开右心耳,用生理盐水将血液冲洗干净,待肝脏颜色变淡、右心耳流出的液体清亮后,用4%多聚甲醛溶液经灌注器进行灌注固定,先快后慢,固定约40~50min,直至大鼠全身僵硬,断头取出脑组织,放入4%多聚甲醛溶液中后固定6h,然后将标本按所需取材放入20%蔗糖溶液过夜,组织块沉底后再放入30%蔗糖溶液过夜,待其再次沉底后进行-20℃恒冷切片机连续切片,切片厚18μm。将载有标本的载玻片在60℃烘干箱中烤4~6h。HE染色步骤:(一)切片放入蒸馏水中5min;(二)切片放入苏木精中染色5~10min,自来水漂洗5~10s,冲净浮色;(三)盐酸酒精中分色数秒,置镜下观察满意为止,自来水漂洗1~2min;(四)氨水中返蓝5~10s,自来水漂洗10~30s;(五)伊红中染色1~2min,自来水漂洗1~2s,冲净浮色;(六)70%、80%、90%、95%酒精中各5min;(七)100%酒精Ⅰ、Ⅱ各10min;(八)二甲苯Ⅰ、Ⅱ中透明各15min,中性树胶封片,光学显微镜下观察。

1.2.6DEACMP模型制备成功的标准

参照日本学者Ochi等[16]关于DEACMP动物模型制备成功的判断标准。用水迷宫实验证实动物发生认知功能障碍,同时HE染色计数海马组织内有细胞损伤,即判断为DEACMP动物模型制备成功。

 

                                                实验所需耗材:

细胞培养板

细胞培养瓶

细胞培养皿

玻底培养皿

玻底培养板

细胞爬片

细胞刮刀

细胞筛网

血清瓶

细菌培养皿

康宁(corning)

耐思(NEST)

伯乐(BIO-RAD)

硕华(Sorfa)

皎洁(JIAO JIE)

密理博(millipore)

创博环球(GLOBALEBIO)

耐思细胞培养皿1150mm

新星(NEWSTAR)

白鲨易(biosharp)

科进(Kirgen)

卧宏生物(WHB)

爱思进(Axygen)

科晶(Crystalgen)

肖特(SCHOTT)

细胞培养板6孔

细胞培养板12孔

细胞培养板24孔

细胞培养板48孔

细胞培养板96孔

细胞培养锥形瓶

细胞培养透气盖悬浮摇瓶

细胞培养锥形瓶125ML

细胞培养锥形瓶250ML

细胞培养锥形瓶500ML

细胞培养锥形瓶1000ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶125ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶250ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶500ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶1000ML

硕华细胞培养瓶T25

硕华细胞培养瓶T75

硕华细胞培养瓶T175

耐思细胞培养瓶T25

耐思细胞培养瓶T75

耐思细胞培养瓶T125

耐思细胞培养瓶T175

耐思细胞培养瓶T225

细胞培养瓶密封盖

细胞培养瓶密封盖

雷磁

求精

广州洁特(jet)

盐城华鸥

蜀牛

kimble chase

Falcon

WATSON

罗氏(Roche)

金佰利

科默斯

武汉华美生物(CUSABIO)

其林贝尔(Kylin-Bell)

Biofroxx

Pall

爱马斯(AMMEX)

麦迪康(Medicom)

世泰(CITOTEST)

Parafilm

古洛玻璃(GOLO)