关键词：细胞计数 DIMT1 胃癌细胞 恶性生物学行为 密理博 millipore 创博环球 GLOBALEBIO 新星 NEWSTAR 白鲨易 biosharp
(1)使用75%的酒精消毒液反复喷洗擦拭细胞计数板及盖玻片，将盖玻片覆盖于计数板上方计数区域；
(2)将待计数细胞使用2ml完全培养基重悬，充分混匀后取25μl细胞混悬液至500μl离心管内，同时向管内加入25μl0.4%台盼蓝染液，充分混匀；
(3)取10μl细胞混悬液从计数板边缘缓慢滴入，使细胞悬液均匀充满计数板及盖玻片之间的空隙（注意不要让细胞混悬液溢出计数板计数区域，同时应缓慢滴入避免气泡产生，影响计数准确性）；
(4)倒置显微镜下观察计数：镜下观察染上蓝色的细胞为死细胞，未染色且反光性强的细胞为活细胞；
(5)统计计数板大方格（4个区域，即左上、左下、右上及右下，每个大方格内有4×4=16个小方格）内细胞数目，如细胞位于方格线上，则仅统计左侧线及下方线上细胞；如方格视野中有两个或者多个细胞组成的细胞团，则仅统计细胞团数目，如细胞团数目超过总数目的10%，则提示细胞重悬不充分，需要重新计数；
(6)根据如下公式计算细胞数目：细胞数（1ml）=4个大方格内细胞数/4×104×稀释倍数（每一个大方格面积为0.01cm2，高为0.01cm，体积为10-4cm3即10-4ml，故每ml细胞数目需要×104）。
实验所需耗材：
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细胞培养板 |
细胞培养瓶 |
细胞培养皿 |
玻底培养皿 |
玻底培养板 |
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细胞爬片 |
细胞刮刀 |
细胞筛网 |
血清瓶 |
细菌培养皿 |
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康宁(corning) |
耐思(NEST) |
伯乐(BIO-RAD) |
硕华(Sorfa) |
皎洁(JIAO JIE) |
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密理博(millipore) |
创博环球(GLOBALEBIO) |
耐思细胞培养皿1150mm |
新星(NEWSTAR) |
白鲨易(biosharp) |
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科进(Kirgen) |
卧宏生物(WHB) |
爱思进(Axygen) |
科晶(Crystalgen) |
肖特(SCHOTT) |
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细胞培养板6孔 |
细胞培养板12孔 |
细胞培养板24孔 |
细胞培养板48孔 |
细胞培养板96孔 |
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细胞培养锥形瓶 |
细胞培养透气盖悬浮摇瓶 |
细胞培养锥形瓶125ML |
细胞培养锥形瓶250ML |
细胞培养锥形瓶500ML |
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细胞培养锥形瓶1000ML |
细胞培养透气盖悬浮摇瓶125ML |
细胞培养透气盖悬浮摇瓶250ML |
细胞培养透气盖悬浮摇瓶500ML |
细胞培养透气盖悬浮摇瓶1000ML |
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硕华细胞培养瓶T25 |
硕华细胞培养瓶T75 |
硕华细胞培养瓶T175 |
耐思细胞培养瓶T25 |
耐思细胞培养瓶T75 |
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耐思细胞培养瓶T125 |
耐思细胞培养瓶T175 |
耐思细胞培养瓶T225 |
细胞培养瓶密封盖 |
细胞培养瓶密封盖 |
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雷磁 |
求精 |
广州洁特(jet) |
盐城华鸥 |
蜀牛 |
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kimble chase |
Falcon |
WATSON |
罗氏(Roche) |
金佰利 |
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科默斯 |
武汉华美生物(CUSABIO) |
其林贝尔(Kylin-Bell) |
Biofroxx |
Pall |
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爱马斯(AMMEX) |
麦迪康(Medicom) |
世泰(CITOTEST) |
Parafilm |
古洛玻璃(GOLO) |
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