关键词:细胞肿胀实验 细胞 AQP9过表达 肝癌 SMMC-7721 细胞侵袭 康宁 corning 耐思 NEST 伯乐 BIO-RAD 硕华 Sorfa

 

1)选择对数生长期细胞状态良好的SMMC-7721/LV-AQP9和SMMC-7721/LV-GFP细胞,常规消化离心,用无血清培养基重悬细胞,用细胞计数板计数将细胞密度调整约1×106个/mL。

2)向无菌流式专用管加入1mL细胞悬液,置于细胞培养箱孵育15分钟。

3)流式细胞检测仪检测初始细胞相对体积V0及直方图,随后向流式专用管内加入0.5mL无菌蒸馏水调节溶液为低渗状态,孵育30秒后再次测量细胞相对体积v1及直方图,重叠前后两个直方图并计算细胞膨胀体积V1-V0,进行统计学分析。

4)进一步行氯化汞(HgCl2)阻滞水通道蛋白实验,同样选择对数生长期细胞状态良好的SMMC-7721/LV-AQP9和SMMC-7721/LV-GFP细胞,常规消化离心,用含100μMHgCl2的无血清培养基重悬细胞,用细胞计数板计数,细胞密度调整约1×106个/mL。

5)同样,向无菌流式专用管加入1mL细胞悬液,置于细胞培养箱孵育15分钟。

6)流式细胞检测仪检测初始细胞相对体积V0及直方图,随后向流式专用管内加入0.5mL无菌蒸馏水调节溶液为低渗状态,孵育30秒后再次测量细胞相对体积v1及直方图,重叠前后两个直方图并计算细胞膨胀体积V1-V0,进行统计学分析。

 

实验所需耗材:

细胞培养板

细胞培养瓶

细胞培养皿

玻底培养皿

玻底培养板

细胞爬片

细胞刮刀

细胞筛网

血清瓶

细菌培养皿

康宁(corning)

耐思(NEST)

伯乐(BIO-RAD)

硕华(Sorfa)

皎洁(JIAO JIE)

密理博(millipore)

创博环球(GLOBALEBIO)

耐思细胞培养皿1150mm

新星(NEWSTAR)

白鲨易(biosharp)

科进(Kirgen)

卧宏生物(WHB)

爱思进(Axygen)

科晶(Crystalgen)

肖特(SCHOTT)

细胞培养板6孔

细胞培养板12孔

细胞培养板24孔

细胞培养板48孔

细胞培养板96孔

细胞培养锥形瓶

细胞培养透气盖悬浮摇瓶

细胞培养锥形瓶125ML

细胞培养锥形瓶250ML

细胞培养锥形瓶500ML

细胞培养锥形瓶1000ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶125ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶250ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶500ML

细胞培养透气盖悬浮摇瓶1000ML

硕华细胞培养瓶T25

硕华细胞培养瓶T75

硕华细胞培养瓶T175

耐思细胞培养瓶T25

耐思细胞培养瓶T75

耐思细胞培养瓶T125

耐思细胞培养瓶T175

耐思细胞培养瓶T225

细胞培养瓶密封盖

细胞培养瓶密封盖

雷磁

求精

广州洁特(jet)

盐城华鸥

蜀牛

kimble chase

Falcon

WATSON

罗氏(Roche)

金佰利

科默斯

武汉华美生物(CUSABIO)

其林贝尔(Kylin-Bell)

Biofroxx

Pall

爱马斯(AMMEX)

麦迪康(Medicom)

世泰(CITOTEST)

Parafilm

古洛玻璃(GOLO)